一、尿標本收集
1、外陰清洗后，用1：1000瓣潔爾滅沖洗，取中間小便送檢。
簡便易行，是目前最常用的留尿方法。
對于嬰幼兒，可用消毒塑料袋固定在外陰部留尿。
注意事項
小嬰兒如30分鐘內未留到尿流需再次消毒。
導尿有帶入細菌的危險，一般盡量不用。
2、恥骨上膀胱穿刺
可在完全無菌條件下進行，結果可靠，簡便安全。
適用于：對中段尿或導悄結果可疑者。
二、檢查
1、尿液直接涂片找菌
取一滴混勻的新鮮尿，置玻片上烘干，用美藍或革蘭氏染色。
在油鏡下每個視野下都能找到一個以上細胞，表明尿內細菌在10萬/ml以上。
特點：簡單迅速，有一定可靠性。
2、尿培養及菌落計數
是診斷本病的重要依據。其中有無細菌生長作診斷依據常出現錯誤，必須同時作菌落計數。
菌落計數10萬/ml以上可確診為尿感，1～10萬/ml為可是疑，少于1萬/ml大多污染。
女孩若是二次尿培養菌落均在10萬/ml以上，且為同一種細菌，可確定診斷。男孩尿標本無污染，菌落在1萬/ml以上，即應考慮菌尿的診斷。
注意事項：應采取新鮮尿液進行培養。如不能即時培養，應隨即放在4℃冰箱內。
3、尿常規
尿沉渣中白細胞>5個/HP應考慮可能為泌尿系感染。但僅檢出白細胞不能確切診斷為上尿路感染。
出現白細胞聚集成堆或見白細胞管型及蛋白尿者則診斷價值更大。
4、菌尿輔助檢查
常用者有亞硝酸鹽還原試驗，本病陽性率可達80%～90%。
特點：簡便、可靠。無假陽性，但如使用抗生素、尿中缺乏硝酸鹽或大量利尿時可為陰性。