輔助生殖技術是當前受不育不孕男女最受歡迎的新型科學技術,對于不孕不育的患者來講,輔助生殖技術不僅為他們解決了不孕不育的難題并且為他們的家庭帶來了無限的歡樂。
一、體外受精與胚胎移植
從人體取出配子使之在體外條件下受精后形成胚胎,然后移植所獲胚胎至子宮腔讓其植入從而建立妊娠的技術,又稱試管嬰兒。
(一)適應癥
1.碘油造影、腹腔鏡術或手術證實輸卵管性不育:如嚴重盆腔粘連、雙側輸卵管梗阻、雙輸卵管切除術后、雙輸卵管結扎術后(必須符合計劃生育政策)等;
2.盆腔子宮內膜異位癥,反復其它治療未能妊娠;
3.頑固性PCOS經反復治療失敗;
4.不明原因不孕,反復的一般治療(包括多次超排卵)失敗;
5.男性因素的不育癥,如少、弱精經一般的治療(包括宮腔內人工受精或結合使用促超排卵技術)后仍未能獲得妊娠的病人。
(二)治療前檢查
女方
進入IVF前的患者需做下列檢查
一般的體格檢查、血液常規、血型、尿常規、肝功能、腎功能、胸部X光檢查、卵泡早期血清激素水平(LH、FSH、PRL、T、E2)、常規婦科檢查、宮頸分泌物的支原體、衣原體檢查;
男方
精液常規>(2次);
在確認患者沒有不能耐受促超排卵及妊娠的內、外科疾病,腫瘤等,確認病人具備恰當的適應證和沒有禁忌癥后,進入治療程序。
(三)技術步驟或注意事項
1. 技術要求包括熟練的超排卵及其監測、取卵、體外受精、胚胎培養、胚胎移植技術;
2. 治療開始之前應向夫婦雙方詳細解釋治療的全過程、可能發生的并發癥及其治療方法,包括可能出現的女方對促超排卵無反應、取卵失敗及不受精等導致的治療失敗。
3. 常規方案為月經周期的黃體中、晚期使用GnRH-a(短效),并于下月經周期第3~5天用FSH啟動,常規啟動的劑量為150~225iu;應根據患者的具體情況對超排卵方案包括使用藥物的類型、劑量、使時間等作具體的調整;
4. 出常規方案的促性腺激素劑量的促排卵方案只能在以下病人使用:以前的治療顯示病人對超排卵治療反應不良、重復三次卵泡早期的血FSH水平>15iu/mL或高于正常參考值+2個標準差、年齡大于40歲;
5. 各種方案的超排過程中,若注射Gn>7天,雙卵巢無合適卵泡發育進行增加劑量后7天卵泡數仍<3個,血清E2值水平仍<1835pmol/L(500pg/ml)為反應不良,建議取消本次IVF-ET治療周期;
6. 根據使用的治療方案制定最少包括超聲顯像和血激素水平測定等措施的監測方案并認真執行;
7. 以黃體期使用促性腺激素釋放激類似物的長方案為例,當使用GnRH-a一周后至月經來潮之前,若陰道B超下發生單/雙卵巢出現有單純性囊腫直徑>1cm且<4cm 時,需要在嚴格消毒下行陰道穿剌抽出囊腫液送病理科檢查,若無異常,方可繼續方案;
8. 當使用FSH,B超監測雙卵巢有卵泡直徑>14mm時需每天監測尿的LH峰;
9. 當有>3個卵泡的平均直徑達到16mm以上或2個大于17mm或1個大于18mm時,可考慮主導卵泡已達成熟階段并使用hCG;
10. 以下情況應停用hCG,取消本周期:當雙卵巢明顯增大、卵泡數>20個時,必須檢查血E2水平,如 E2水平>11000pmol/L(3000pg/ml)時,或當雙卵巢明顯增大>10cm,或當卵泡數>30個時,伴隨有或沒有腹水的出現,估計發生OHSS可能性大時;
11. hCG使用劑量常規為10000iu,注射后36~38小時取卵;
12. 取卵手術以經陰道超聲顯像引導下的卵泡穿刺引流術最為常用;手術過程既要注意無菌,也要注意無毒,以避免培養系統的影響;以無菌生理鹽水清洗外陰及陰道,注意用力過度可能誘發卵泡破裂;可采用靜脈麻醉或術前30分鐘采用鎮痛或鎮靜劑如肌注杜冷丁等,術前排空膀胱,取截石位,無菌生理鹽水反復沖洗外陰和陰道。手術時盡量減少穿刺次數,避免損傷腸管、血管、輸尿管、膀胱等,必要時可應用抗生素預防感染;
13. 術后可給予黃體酮或hCG進行黃體支持,注意如出血、感染、創傷等穿刺取卵術并發癥的發生;
14. 當取卵>20個時,不能使用hCG進行黃體支持,并嚴密監測患者情況,注意OHSS的發生,并向患者交待注意事項。在胚胎移植當日,患者若出現OHSS的癥狀且中量以上腹水,雙卵巢明顯增大,雌激素水平較取卵前明顯升高,取消本周期的宮腔胚胎植入,以后放置冷凍胚胎;
15. 所獲卵子培養4~6小時后,向每個卵加入1×105條經洗滌的活動精子進行體外受精后繼續培養;
16. 受精后16~20小時,除去卵母細胞周圍的顆粒細胞,觀察并確認受精情況;于倒置顯微鏡下,這時可以看到卵細胞內出現兩個圓形結構,約1.5~2.0um,較致密光潔,這就是雌雄圓核,標志著正常受精的成功,卵細胞已成為受精卵又稱合子。而無原核或出現單個的或三個以上的原核均提示異常受精;
17. 依據所采用的培養系統的差異,可于取卵后的2至5天進行胚胎移植,胚胎將處于多卵裂球至囊胚階段。移植胚胎的數目應限制在3個以下,囊胚移植可僅移植1個或2個胚胎,對于40歲以上或反復治療失敗的患者可以考慮移植4個胚胎。將胚胎以專用的移植導管通過宮頸移植入宮腔,術后患者臥床休息1~6小時;
18. 隨診,于IVF-ET術后兩周后若月經未來潮,晨尿查hCG或測定血清?-hCG水平以判斷妊娠,如陽性后于二至三周后超聲檢查有孕囊及胚芽與心血管搏動可以確定臨床妊娠,孕產期應加強檢查,及時作出相應處理,要注意宮外孕發生的可能;
19. 當患者有三次常規IVF-ET失敗病史時,在申請第四次行IVF-ET治療時,治療方案必須在包括臨床醫生、實驗室工作人員、護理人員的討論會議上制訂;
20. 二次IVF超排周期之間的間隔要大于3個月;
21. 前次常規IVF受精率<30%或完全不受精時,再次IVF治療時,應先調查可能的不受精原因,并須考慮是否行ICSI和做進行ICSI的準備;
22. 對重復治療的病例,接診醫師必須詳細重溫原病歷,進行必要的檢查以指導確定新的治療方案,若發現問題及時向上級醫師提出并詳細記錄;
23. 每周期在胚胎移植后給hCG行黃體支持(OHSS患者除外)。